做microRNA報告基因實驗免費贈送生物信息學服務！

                                                   microRNA定量PCR 40元/孔！
                                                    microRNA-Seq  4500元/樣本（10M reads）!

    
    英拜生物可為您提供microRNA生物信息學分析到報告基因載體構建、檢測服務整套服務，可加速科研人員對microRNA的功能研究。深入的生物信息學分析不僅可以為microRNA功能研究指引方向，也是解析microRNA調控網絡的必備利器。
本公司采用 的psiCHECK-2報告基因載體，具有多克隆位點，方便插入目的靶點序列，用于終點法的細胞裂解物檢測，包含螢火蟲熒光素酶基因，使海腎熒光素酶的表達水平歸一化，所以無須通過共轉染進行歸一化，令該系統更可靠、重現性更好。本公司專業技術服務人員就可替您完成載體構建，為您節省大量的時間和精力。


英拜生物microRNA報告基因實驗流程：
1.microRNA靶點的預測
利用Targetscan,miRanda,Microcosm,Pita等軟件得到目的microRNA的預測靶點序列(客戶提供或由我公司預測)。
2.獲得microRNA靶點序列
根據提供的靶序列，合成兩條互補的單鏈DNA模板。或者，設計引物PCR擴增目的microRNA靶基因3’UTR序列。
3.microRNA靶序列克隆
將合成的兩條單鏈退火成雙鏈（具有粘性末端），或將PCR產物雙酶切，后連入經過同樣雙酶切的psicheck報告基因載體中，連接產物轉化大腸桿菌DH5α。
4.陽性克隆鑒定。
挑選轉化的菌落，雙酶切鑒定陽性克隆，并測序驗證克隆的序列和目的microRNA靶序列一致。
5.細胞轉染準備
將含目的microRNA靶基因的psicheck報告基因載體和microRNA mimics或microRNA negative control共轉染293T或Hela細胞。
6.熒光素酶檢測
共轉染細胞24-72h后，進行雙熒光素酶檢測。
7.整理分析數據，得出結論。
提供有microRNA靶序列的報告質粒一份,甘油保存菌株各一支。附實驗報告，包括載體構建過程，鑒定記錄，測序報告，細胞轉染，熒光檢測。

在本公司做microRNA靶基因報告基因實驗，可以享受a-f中一項免費生物信息學服務：

a)差異表達microRNA的篩選和聚類分析
b)microRNA靶基因預測
c)microRNA與靶標基因的調控網絡構建
d)microRNA與編碼蛋白基因共轉錄預測
e)microRNA與GO的調控網絡構建
f)microRNA與KEGG Pathway的調控網絡構建
g)microRNA甲基化位點預測
h)microRNA轉錄因子結合位點預測
i)microRNA與轉錄因子相互調控網絡構建
j)轉錄因子與microRNA靶標基因調控網絡構建
k)microRNA 、轉錄因子與靶標基因三者復雜調控網絡構建